Generazione e Analisi Trascrittomica a Cellula Singola del Carcinoma Epatico in Organoidi dopo Trattamento Farmacologico

Il carcinoma epatico cellulare è una delle principali cause di mortalità correlata al cancro a livello mondiale e si caratterizza per una marcata eterogeneità intratumorale, che contribuisce a risposte terapeutiche variabili, recidiva tumorale e progressione della malattia. Una maggiore comprensione di come le cellule tumorali cambiano a livello trascrizionale prima e dopo il trattamento farmacologico è quindi essenziale per migliorare le strategie terapeutiche. Tuttavia, flussi di lavoro sperimentali pratici che collegano il trattamento farmacologico basato su organoidi con la profilazione trascrittomica a cellule singole downstream rimangono limitati. In questo studio, è stata sviluppata una procedura standardizzata per la generazione di organoidi di carcinoma epatico cellulare, l'applicazione di trattamento farmacologico definito e l'esecuzione di profili trascrittomici a cellule singole downstream. **METODI** La procedura standardizzata per la generazione di organoidi di carcinoma epatico cellulare è stata sviluppata utilizzando una combinazione di tecniche di ingegneria genetica e di coltura cellulare. I campioni di tessuto tumorale sono stati prelevati da pazienti affetti da carcinoma epatico cellulare e sono stati utilizzati per la creazione di organoidi in vitro. I trattamenti farmacologici sono stati applicati agli organoidi utilizzando una combinazione di tecniche di somministrazione e di dosaggio. **RISULTATI** I risultati hanno mostrato che la procedura standardizzata per la generazione di organoidi di carcinoma epatico cellulare è in grado di produrre organoidi che mantengono le caratteristiche trascrittomiche delle cellule tumorali originali. Inoltre, i trattamenti farmacologici hanno mostrato di essere in grado di influenzare le caratteristiche trascrittomiche degli organoidi, con un aumento della sensibilità ai trattamenti farmacologici rispetto alle cellule tumorali originali. **CONCLUSIONI** I risultati di questo studio dimostrano che la procedura standardizzata per la generazione di organoidi di carcinoma epatico cellulare è un utile strumento per lo studio della sensibilità ai trattamenti farmacologici e per la valutazione delle strategie terapeutiche. Inoltre, la combinazione di tecniche di ingegneria genetica e di coltura cellulare è stata dimostrata essere un approccio efficace per la creazione di organoidi che mantengono le caratteristiche trascrittomiche delle cellule tumorali originali.